注意事項
?。薄⒀∮沒鈐舊て誥秩舊?nbsp;, 老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性 。
?。病⑼科灰斯? ,以免脫色不完全造成假陽性 。
【革蘭氏染色的注意事項】 ?。場⑼焉歉錮際先舊欠癯曬Φ墓丶?nbsp;, 脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性 。
實驗流程
?。薄⑷≡夭F蒙床疾糧? ,載玻片的一面用馬克筆畫一個小圈(用來大致確定菌液滴的位置) 。涂菌的部位在火焰上烤一下 , 除去油脂 。
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液體培養基:左手持菌液試管,在酒精燈火焰附近5厘米左右打開管蓋;右手持接種環在火焰中燒灼滅菌,等冷卻后從試管中沾取菌液一環,在潔凈無脂的載玻片上涂直徑2毫米左右的涂膜,最后將接種環在火焰上燒灼滅菌 。
固體培養基:先在載玻片上滴一滴無菌水,再用接種環取少量菌體,涂在載玻片上,使其薄而均勻 。
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?。礎⒐潭ǎ喝鎂こ?,通過火焰2-3次固定(以不燙手為宜) 。
?。怠⑷舊航潭ü耐科瘧ㄖ繳希?滴加草酸銨結晶紫液,染1分鐘 。
?。丁⑺矗河盟郝逑賜科系娜舊? ,用吸水紙吸干 。簡單染色結束可觀察細胞形態 。
?。貳⒚餃荊旱渭櫻鋇蔚庖海荊狽種櫻?水洗 。
?。浮⑼焉何ゲ辛羲? ,連續滴加95%乙醇脫色20-30秒至流出液無紫色,立即水洗 。
?。埂⒏慈荊旱渭愚旄慈荊常搗種?nbsp;, 水洗 。至此,革蘭氏染色結束 。
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